Juliane Köhler étudie le théâtre à New York, puis fait ses débuts professionnels au sein du Théâtre national de Basse-Saxe à Hanovre. Elle rejoint ensuite la troupe du Théâtre de la Résidence à Munich. Elle s'impose rapidement comme une comédienne de premier plan à travers ses rôles dans des pièces telles "Hedda Gabler" d'Ibsen ou "Mademoiselle Else" de Schnitzler.
1995, elle est nommée Meilleur espoir féminin par le Ministère de la Culture bavarois.
1999, elle interprète "Stella" et "La dame aux camélias" mises en scène par Amelie Niermeyer à Francfort. Elle a joué depuis à l'Actor's Studio de Munich.
1993, elle fait ses débuts au cinéma avec SCHATTENBOXER de Lars Becker. Le film lui permet de décrocher plusieurs rôles importants dans des téléfilms, comme 'Inzest - Ein Fall für Sina Teufel' (1995) de Klaus Emmerich et "Koma-Zwischen Leben und Tod" d'Uwe Janson (1996). Guest-star de plusieurs séries télévisées comme "Tatort" et "Bella Block", elle revient au cinéma en 1999 avec AIMEE & JAGUAR de Max Fäberböck, dans lequel elle interprète Lilly Wust, une Berlinoise mariée qui tombe amoureuse d'une femme juive, Felice Schragenheim (Maria Schneider) à Berlin pendant la Seconde guerre mondiale. Récompensée pour son rôle par l'équivalent allemand du César et par le Prix du Cinéma bavarois, elle obtient également l'Ours d'argent de la meilleure actrice au Festival du Film de Berlin en 1999. La même année, elle est à l'affiche d'ANNALOUISE & ANTON, adaptation triomphale d'une oeuvre d'Erich Kästner par Caroline Link.
2001, elle tourne sous la direction de la même réalisatrice NOWHERE IN AFRICA, couronné à l'Oscar. Son dernier film est KÖNIGSKINDER réalisé par Anne Wild.
Filmographie 2005 Nimm dir dein Leben
de Sabine Michel
2004 Der Untergang
(La chute) de Oliver Hirschbiegel
2003 NeuFundLand
de Georg Maas
2002 Mein erstes Wunder
de Anne Wild
2001 Nirgendwo in Afrika
de Caroline Link
2001 Hood
(A travers bois )
de Sylvia Dahmen
2001 Weiser
de Wojciech Marczewski
1999 Pünktchen und Anton
(Annaluise et Anton )
de Caroline Link
1999 Aimée & Jaguar
de Max Färberböck
1998 Nighthawks
de Dmitri Popov
1992 Schattenboxer
de Jens Becker
Lars Becker